- SOP.SER.A.5, V.2; BLUEDIVER II Definitief

Klinisch Laboratorium
Heilig-Hartziekenhuis
Mechelsestraat 24, B-2500 Lier
Tel.: 03-491 30 70 • Fax: 03-491 30 89

BLUEDIVER II

DocNr SOP.SER.A.5	Versie 2		Status Definitief	Auteur Céline Marsboom
Aangemaakt op 24/Feb/2023	Verstuurd op 20/Mar/2023	Geldig van 04/Apr/2023	Geldig tot 04/Apr/2026	Gearchiveerd op

1. Onderwerp

Deze procedure beschrijft de werking, het gebruik en het onderhoud van de Bluediver II vertegenwoordigd door de firma Alphadia.
Het is een BRIANT-netwerkproject. Alle stalen van de verschillende ziekenhuizen worden gecentraliseerd in het labo in Lier. Het uitvoeren van deze analyses vindt plaats in Lier op toestel Bluediver II.

2. Toepassingsgebied

De Bluediver II wordt gebruikt voor bepaling van antistoffen in kader van auto-immuniteit in serum. Deze test wordt ingezet indien de ANA IFA screening positief is. Afhankelijk van het patroon en kliniek van de patiënt wordt er één of meerdere blots geselecteerd.

3. Definities en termen

- ANA: antinucleaire antistoffen
- IFA: immuunfluorescentie analyse

4. Principe

Het testprincipe is enzyme immunoassay. De teststrips bestaan uit een membraan met antigenen gefixeerd op een plastiek drager. Tijdens een geautomatiseerde testprocedure worden de strips geïncubeerd en gewassen in de wells van een gebruiksklare reagentia cartridge.
Antilichamen uit het serum binden, indien aanwezig, aan de overeenkomstige antigenen op de strips. Aanwezige antilichamen worden zichtbaar als paarse dots op de membranen van de strips. De intensiteit hiervan is rechtevenredig met de hoeveelheid aanwezige antilichamen.
Er wordt gewerkt met 4 strips:

Type strip Op te sporen antistoffen

AD ANA19DBDM Antistoffen tegen nucleosomen, dsDNA, histonen, Sm, RNP (68kD/A/C), Sm/RNP, SSA/Ro 60kD, SSA/Ro 52kD, SSB, Scl-70, RNA Polymerase III, Ku, PM-Scl 100, Mi-2, Jo-1, CENP-A/B, PCNA, Ribosoom P0 en DFS70 worden opgespoord.

AD MYOS12ADBD Antistoffen tegen Jo-1, PL-7, PL-12, EJ, OJ, SRP, Mi-2, MDA-5, TIF1-y, SAE1, SAE2 en NXP2 worden opgespoord.

AD LIVER10DBD Antistoffen tegen M2/nPDC, M2/OGDC-E2, M2/BCOADC-E2, M2/PDC-E2, gp210, sp100, LKM1, LC1, SLA, F-Actin worden opgespoord.

AD SCLERO12DBD Antistoffen tegen Scl-70, CENP-A, CENP-B, PMScl-100, PMScl-75, Ku, RNA Polymerase III, RNP (68kD/A/C), Th/To, Fibrillarin, NOR-90 en SSA/Ro 52kD worden opgespoord.

5. Veiligheid

Zie algemene veiligheidsvoorschriften laboratorium, SOP.ORG.22: “Veiligheid & hygiëne”.

6. Reagentia en materiaal

6.1 Reagentia

- AD ANA19DBDM (kit met strips en reagentia catridges): Antistoffen tegen nucleosomen, dsDNA, histonen, Sm, RNP (68kD/A/C), Sm/RNP, SSA/Ro 60kD, SSA/Ro 52kD, SSB, Scl-70, RNA Polymerase III, Ku, PM-Scl 100, Mi-2, Jo-1, CENP-A/B, PCNA, Ribosoom P0 en DFS70 worden opgespoord.
- AD MYOSO12ADBD (kit met strips en reagentia catridges): Antistoffen tegen Jo-1, PL-7, PL-12, EJ, OJ, SRP, Mi-2, MDA-5, TIF1-y, SAE1, SAE2 en NXP2 worden opgespoord.
- AD LIVER10DBDM (kit met strips en reagentia catridges): Antistoffen tegen M2/nPDC, M2/OGDC-E2, M2/BCOADC-E2, M2/PDC-E2, gp210, sp100, LKM1, LC1, SLA, F-Actin worden opgespoord.
- AD SCLERO12DBD (kit met strips en reagentia catridges): Antistoffen tegen Scl-70, CENP-A, CENP-B, PMScl-100, PMScl-75, Ku, RNA Polymerase III, RNP (68kD/A/C), Th/To, Fibrillarin, NOR-90 en SSA/Ro 52kD worden opgespoord.

6.2 Materiaal

- Adaptors voor monstertubes
- Pipettips 100µL met filter

7. Analysemonster

Serum (EDTA-, citraat- of heparineplasma is volgens de bijsluiters ook mogelijk).
Er wordt standaard gebruikt gemaakt van serum aangezien dit staaltype werd gebruikt voor onze validatie.

8. Werkwijze

Start het toestel op met de knop vooraan, de software start automatisch mee op.
Het toestel voert een zelftest uit.
Open het programma MeLinDA Bluediver II op de ZenitHUB pc.
Meld aan in ZenitHUB met MLTLIER (wachtwoord: Lier1234!).
Ga in het tabblad 'Daily work' naar Bluediver.
Selecteer de testen die je wilt uitvoeren.
Druk op 'Launch new session'.
Kijk de lotnummers van de kits na, maak indien nodig een nieuw lot aan.
Klik op 'Enter worklist'.

Er verschijnt een pop-up: 'Process finished succesfully'.
Klik op 'OK'.
Ga verder op de computer van de Bluediver.
Klik op 'nieuwe test'.
Log in met je persoonlijke gebruiksnaam en wachtwoord.
Kies de klem die je wilt gebruiken.
Klik op 'CSV-bestand importeren'.
Selecteer het juiste bestand in de map: Local Disck (C:)> ZenitHUB-BDII> Worklist_IN.
Kies het juiste bestand.
Er verschijnt een pop-up: 'bestand correct geïmporteerd'.
Klik op 'OK'.
Klik op 'Volgende'.
Plaats een monster in de houder op het toestel, het staal wordt automatisch gescand. Er zijn houders met verschillende lengtes beschikbaar voor de verschillende types van tubes. Stalen met weinig volume mogen in een cupje in een buisje aangeboden worden.
De aangevraagde strips worden getoond.
Kies 'volgende monster' om nog stalen toe te voegen en herhaal de vorige stap.
Kies 'laden voltooid' wanneer alle stalen aan boord zijn.
Je krijgt een overzicht met alle monsters en strips die bepaald worden.
Klik op 'volgende'.
Laad de strips en reagentia cartridges op de aangegeven plaatsen.

Plaats de klem in de houder achteraan het toestel met de barcode naar achter (let op dat de strips er niet uit vallen! Klem dichthouden bij het plaatsen).
Controleer de uitlijning van de strips door lang op 'Jog' te duwen. De strips moeten in de blauwe vakjes komen. Pas indien nodig de uitlijning van de strips aan.
Klik op 'identificatie': de strips en patronen worden gescand.
Klik op 'volgende'.
Maak de container van de tips leeg en vink dit aan.
Kijk na of er voldoende pipettips aanwezig zijn in het gele blok of vervang, indien nodig, het tipblok nodig.
Start de run.
Nadat alle incubatiestappen voltooid zijn wordt het volgende scherm weergeven.
Klik op 'Einde'.
Stalen kunnen uit het toestel gehaald worden. Klik op 'Carrousel' om de schijf 1/3 te laten draaien.
Haal de klem uit het toestel en plaats deze in de houder van de het droogmodule (rechts opzij van het toestel).
Klik op het icoon 'Een klem drogen', dit proces duurt 6 min.
Haal de klem uit de droger en plaats deze in de scanner met de dots naar beneden.
Klik op 'een klem scannen'.
Selecteer de klem die je wilt scannen en klik op 'Scannen'.

9. Verwerken van de resultaten

Klik op 'Resultaten weergeven'.
De testresultaten worden weergeven in een tabel.
Achter elke foto van een strip staat een symbool:
- : de strip is leesbaar en gevalideerd door de software
- : de strip is leesbaar, maar de resultaten moeten worden nagekeken en mogelijk gecorrigeerd worden voor de strip gevalideerd kan worden
- : de strip is niet leesbaar
Dubbelklik op elke strip of klik op 'Details' om gedetailleerde resultaten van één strip te bekijken.
Links onderaan wordt een lijst met waarschuwingen weergeven, rechts onderaan eventuele aanpassingen die door de gebruiker moeten worden uitgevoerd.
Het kruis op de afbeelding geeft de plaats aan waar de dot beoordeeld wordt.
Het is belangrijk dat de dots op de juiste plaats worden afgelezen. Kijk dit bij elke strip afzonderlijk na!
De positie van het kruis kan aangepast worden door te dubbelklikken op de dot en het kruis te verplaatsen. Je kan een dot ongeldig maken door op disable de klikken.
Bij de ANA blot wordt er per antigen gebruik gemaakt van 3 dots waarvan de gemiddelde waarde genomen wordt bij het aflezen. Je kan kiezen om de afleesplaats van de 3 dots samen of apart te verplaatsten door 'Dots linked' aan of uit te vinken. Er kunnen ook 1 of meerdere dots ongeldig gemaakt worden (Disable/Enable).

Door op 'All' te klikken kan je de lijn van aflezen verplaatsen tussen de eerste positieve controle en de laatste negatieve controle.
Klik op 'Save' wanneer alle strips nagekeken zijn
Klik op 'Analyses opzoeken'
Filter de resultaten op datum van de run die je wilt doorsturen.
Klik één van de strips open
Ga naar het tabblad 'information'
Kies 'View all strips on scan'
Klik op 'Export results in CSV'
Kies volgende map: Local Disk (C:) > ZenitHUB-BDII > Result_OUT.
Geef het bestand een naam: JJJJMMDD.
Klik op 'Save'.

Ga in ZenitHUB naar het tabblad 'Daily work'.
Ga naar het tabblad 'Bluediver'.
Klik op 'recieve session results.'
Klik op 'Validate results'.
Selecteer de resultaten die je wilt valideren.
Klik op 'Validate results' (Let op dat je geen ZenitPRO resultaten valideert van de andere sites!).

9.1 Doorsturen van ruwe data

Na de run worden de ruwe data van de run doorgestuurd naar de andere labo's.

Klik op 'een analyse zoeken'
Filter op datum
Open een willekeurig staal
Ga naar het tabblad 'information'
Klik op 'view all strips on scan'
Klik op het PDF icoon
selecteer 'both' en klik op het vinkje
Sla het pdf bestand op op de usb die voorraan in het toestel steekt
Stuur het bestand door naar volgende e-mail adres: bluediver@heilighartlier.be

10. Kalibratie

NVT

11. Onderhoud

11.1 96-Tips-plaat vervangen
Wanneer de houder met tips vervangen moet worden kan je het pipetteerplatform naar rechts verplaatsten om hier beter aan te kunnen.
Klik op hiervoor op 'pipetteerplatform'.

11.2 Dagelijks onderhoud
- Verwijder de gebruikte reagenscartridges en strips
- Afsluiten van het toestel:
Klik op 'Afsluiten'

-Klik op 'Shutdown'. Het programma en toestel sluiten af.

11.2 2-wekelijks onderhoud
Reinig de glasplaat van de scanner met een vochtige doek.

12. Kwaliteitscontrole

NVT

13. Opmerkingen

Er zijn geen opmerkingen voor deze procedure.

Opgelet: Dit document is opgenomen in zowel het eigen kwaliteitssysteem als het gemeenschappelijk kwaliteitssysteem BRIANT Klinisch laboratoria. In beide systemen moet er nieuwe versie worden aangemaakt bij wijzigingen.

Gerelateerde documenten

STK.SER.22 BLUEDIVER II

Type strip	Op te sporen antistoffen
AD ANA19DBDM	Antistoffen tegen nucleosomen, dsDNA, histonen, Sm, RNP (68kD/A/C), Sm/RNP, SSA/Ro 60kD, SSA/Ro 52kD, SSB, Scl-70, RNA Polymerase III, Ku, PM-Scl 100, Mi-2, Jo-1, CENP-A/B, PCNA, Ribosoom P0 en DFS70 worden opgespoord.
AD MYOS12ADBD	Antistoffen tegen Jo-1, PL-7, PL-12, EJ, OJ, SRP, Mi-2, MDA-5, TIF1-y, SAE1, SAE2 en NXP2 worden opgespoord.
AD LIVER10DBD	Antistoffen tegen M2/nPDC, M2/OGDC-E2, M2/BCOADC-E2, M2/PDC-E2, gp210, sp100, LKM1, LC1, SLA, F-Actin worden opgespoord.
AD SCLERO12DBD	Antistoffen tegen Scl-70, CENP-A, CENP-B, PMScl-100, PMScl-75, Ku, RNA Polymerase III, RNP (68kD/A/C), Th/To, Fibrillarin, NOR-90 en SSA/Ro 52kD worden opgespoord.